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人白細(xì)胞介素18(IL-18)elisa試劑盒如何操作
更新時(shí)間:2017-05-22   點(diǎn)擊次數(shù):859次

人白細(xì)胞介素18(IL-18)elisa試劑盒基本信息

中文名稱白細(xì)胞介素-18

英文名稱interleukin-18;IL-18

定  義屬IL-1家族,可由多種組織細(xì)胞產(chǎn)生,能誘導(dǎo)Th1細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子,NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性,促進(jìn)T細(xì)胞增殖,與IL-12產(chǎn)生協(xié)同作用。

應(yīng)用學(xué)科 免疫學(xué)(一級(jí)學(xué)科),免疫系統(tǒng)(二級(jí)學(xué)科),免疫分子(三級(jí)學(xué)科)

人白細(xì)胞介素18(IL-18)elisa試劑盒如何操作  

實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

    我司elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、性價(jià)比高、樣品所需量少

1.操作簡(jiǎn)單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡(jiǎn)單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時(shí)間。

2.靈敏度高。 酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。我們的試劑盒實(shí)現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對(duì)其進(jìn)行定量。

3.特異性強(qiáng)。特異性來(lái)自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質(zhì)。

4.性價(jià)比高,質(zhì)量穩(wěn)定。

5.樣品所需量少。

如果需要了解該產(chǎn)品詳細(xì)信息歡迎大家。

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